产品规格：T25培养瓶x1；1.5ml冻存管x2
细胞数量：1x10^6；1x10^6
保存温度：37℃；-198℃
运输方式：常温保温运输；干冰运输
安全等级：1
用途限制：仅供科研3类
培养体系：DMEM高糖培养基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%双抗（Hyclone）
培养温度：37℃
二氧化碳浓度：5%
简介：猪肾细胞LLC-PK1细胞源自3~4周龄的Hampshire猪肾组织，可产生纤溶酶原激活物。该细胞引种自ATCCCL-101
注释：Doublingtime:~24hours(DSMZ).
Derivedfromsamplingsite:Kidney.
STR信息：/
参考文献
PubMed=828141;DOI=10.1007/BF02797469
HullR.N.,CherryW.R.,WeaverG.W.
Theoriginandcharacteristicsofapigkidneycellstrain,LLC-PK1.
InVitro12:670-677(1976)
PubMed=19508353;DOI=10.1111/j.1744-313X.2009.00853.x
HoC.S.,Franzo-RomainM.H.,LeeY.J.,LeeJ.H.,SmithD.M.
Sequence-basedcharacterizationofswineleucocyteantigenallelesincommerciallyavailableporcinecelllines.
Int.J.Immunogenet.36:231-234(2009)
PubMed=20555413;DOI=10.1139/y10-023
GunnessP.,AleksaK.,KosugeK.,ItoS.,KorenG.
ComparisonofthenovelHK-2humanrenalproximaltubularcelllinewiththestandardLLC-PK1celllineinstudyingdrug-inducednephrotoxicity.
Can.J.Physiol.Pharmacol.88:448-455(2010)
验收细胞注意事项
1、收到猪肾细胞；LLC-PK1细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。
2、收到猪肾细胞；LLC-PK1细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止3-5小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到猪肾细胞；LLC-PK1细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清。刚接到细胞，若细胞不多时血清浓度可以加到15％去培养。若细胞迏到80%左右，血清浓度还是在10％。
4、收到猪肾细胞；LLC-PK1细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下5-10ML培养基继续培养：超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000转/分钟离心3分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于4℃冰箱，以备不时之需。
6、24小时后，猪肾细胞；LLC-PK1细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS或Hanks’液洗涤后弃去。加0.5-1ml0.25%含EDTA的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般1-3分钟，不超过5分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入3-5ml培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2培养。